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Location:

Altensteinstr. 23a (SupraFAB), lab 026.2 (OM S2 area))

SN: 2842000010 (Stand: 3858000353)

FUB: 7200010545

Responsible persons & bookingBooking: https://fub.openiris.io/timeline/6d3fa1a6-d91d-4f4e-906d-76d4893d14b1

Detailed information and protocols how to use OpenIris you find here.

Requirements e.g. device specific training & safety briefing:

1. Register as new user via the SupraFAB Homepage participate in person in the SupraFAB safety briefing (see SupraFAB Homepage); & become familiar with the safety guidelins, instructions and rules & biolab agreement.

2. Fill the transponder form with work safety questionaire(2. page), let it sign by your research group head and the respective responsible persons in supraFAB and finally hand in to Katharina Tebel (office 103) or Achim Wiedekind (office 102). 

3. Make an appointment with your Keyuser*, to get practical training (2-3 session) & an intro to the OM, the BioSupraMol, data handling (network) as well as the SupraFAB House guidelines.
   In case you are the first person of your group who wants to use the device or in case of fuurtehher questions, contact the responsible person shown in OpenIris (https://fub.openiris.io/timeline/ba8e4fb9-4cf9-43c7-8a4e-ad5b96d41a57).
4. Follow the addtional info for full accesss on the Access to the Optical Microscopy (OM) Facility page.
5. Book the device using OpenIRIS (protocls see here).

Note: Scientific guests as well as non-scientific staff such as service personal from companies also need to get introduced by one of the PIs for genetic engeeneering (see Biolab Team & Lab Phone Numbers). The introducution and documentation forms and slides can be found on the safety intro page (https://wikis.fu-berlin.de/x/pQhVT). The documentation forms and permission forms need to be stored in the repsective folder in office 111.

Zeiss LSM 980 AiryScan with FLIM (PicoQuant)

The Zeiss LSM 980 AiryScan with FLIM (PicoQuant) offers high resolution at a fast image acquisition rate and can therefore be used to image dynamic processes such as interactions of particles with living cells, viral infections, drug release and membrane binding processes. Spectral detection allows multiplexing by separating the fluorescence spectra of the dyes used. The FLIM module of PicoQuant also enables fluorescence lifetime measurement (FLIM) so that, for example, changes in the fluorescence spectra or fluorescence lifetime caused by the environment can be detected. Moreover it is equipped with an incubation chamber with CO₂ for life cell imaging.

Suitable for

• Living and fixed samples
• Fluorescence colored samples
• Confocal imaging,
• Tile or mosaic scans, z-stacks, multicolor imaging, timelapse
• FLIM

Microscope Stand

Stand orientation: Inverted

Condenser: LD-Kondensor 0,55 H, Ph1, Ph2, Ph3, DIC, DIC; 6-fach mot. mit motorisch bedienbarer Aperturblende und Revolverscheibe, a=26mm Für Objektivvergrößerungen 4,0x-100x

Microscope Details

Objectives:

• Objektiv Plan-Apochromat 10x/0,45 M27 (a=2,1mm)
• Objektiv LD LCI Plan-Apochromat 25x/0,8 Imm Korr DIC M27 für Wasser-, Silikonöl-, Glyzerin- oder Öl-Immersion (D=0-0,17mm) (a=0,57mm bei D=0,17mm)
• Objektiv alpha Plan-Apochromat 100x/1,46 Oil DIC M27 (a=0,10mm), (UV)VIS-IR, inkl. Immersol 518 F, Öler 20ml und Deckgläser, hoch präzise, D=0,17mm
• Objektiv EC Plan-Neofluar 40x/1,30 Oil DIC M27 (a=0,21mm)
• Objektiv LD LCI Plan-Apochromat 40x/1,2 Imm autocorr DIC M27 für Wasser-, Silikonöl- oder Glyzerin-Immersion (D=0-0,17mm) (a=0,40mm bei D=0,17mm)
• Objektiv C-Apochromat 63x/1,2 W autocorr M27 (D=0,14-0,19mm) (a=0,28mm bei D=0,17mm), UV-VIS-IR
• Objektiv C Plan-Apochromat 63x/1,4 Oil DIC M27 (a=0,14mm), UV-VIS-IR

XY stage: Scanningtisch 130x100 PIEZO (D) für Axio Observer - mit Linear-Sensoren und Piezo-Antrieb - Fahrbereich: 130 mm x 100 mm - max. Geschwindigkeit 100 mm/sec - Auflösung: 0,1 μm - Reproduzierbarkeit: +/- 0,6 μm - absolute Genauigkeit: +/- 3 μm

Z focus device:  Z-Piezo Tischaufsatz WSB 500 (D) inklusive Ansteuerelektronik, Steuerung und Ansteuerkabel. Z Hub 500 Mikrometer, Z-Trieb Hub=13 mm, mot. Huberweiterung von 10 auf 13 mm

Illumination (for preview by eye pieces):

• Leuchte HAL 100 mit Quarzkollektor
• Beleuchtungseinrichtung HXP 120 V

Fluorescent filter cubes (for preview by eye pieces)::

• Filterset 38 Endow GFP shift free (E) EX BP 470/40, BS FT 495, EM BP 525/50
• Filterset 43 Cy 3, d=25 shift free (E) EX BP 545/25, BS FT 570, EM BP 605/70
• Filterset 49 DAPI shift free (E) EX G 365, BS FT 395, EM BP 445/50

Lasers (illumination):

• Dioden Laser 405nm CW/PS (pulsed) - 980 Umschaltbar zwischen CW und gepulstem Betrieb. Frequenzen 20, 50 und 80 MHz Leistung am Faserausgang 15 mW
• Dioden Laser 488 nm
• Diodenlaser 445 nm für Laser/Elektronik Rack mit 561 nm Laser (D) 7,5 mW am Faserausgang
• Dioden Laser 514 nm (D) 10 mW am Faserausgang
• DPSS Laser 594 nm (D) 2,5 mW am Faserausgang
• DPSS Laser 561 nm
• Dioden Laser 639 nm

Detection:

• PMT1: Blaulicht-sensitiver
• PMT2: Rotlicht sensitiver
• Spektraldetektor Quasar 32
• Airyscan 2, Spektral Detektor 32 Kanäle GaAsP PMT plus 2 Kanäle MA-PMT, Counting Elektronik für 4 Kanal und 32 Kanal Quasar Hardware Voraussetzung am 4 und 32ch Spektraldetektor LSM 980 für Bildaufnahme im Photonenzählmodus
  
  • Emissionsfilter BP 420-480 + BP 495-550 Airyscan
  • Emissionsfilter BP 495-550 + LP 570 Airyscan
  • Emissionsfilter BP 570-620 + LP 655 Airyscan
  • Emissionsfilter BP 420-480 + BP 495-620 Airyscan
  • Emissionsfilter BP 420-480 + LP 605 Airyscan
  • Emissionsfilter BP 465-505 + LP 525 Airyscan
• Durchlichtdetektor T-PMT für LSM 980

Software: ZEN 3.6 mit ZEN Modul Measurement - ZEN Modul Multi Channel - ZEN Modul Panorama - ZEN Modul Manual Extended Focus - ZEN Modul Image Analysis - ZEN Modul Time Lapse - ZEN Modul Z Stack - ZEN Modul Extended Focus - ZEN Modul Autofocus - ZEN Modul Colocalisation - ZEN Modul Spectral Unmixing (nur LSM) - ZEN Modul Counting - ZEN Modul LSM Plus - ZEN Modul Airyscan 2 Multiplex Plus

More information

Incubation: Incubator with temperature control 20-45°C (temperature accuracy: +/- 0.1°C) and CO2 module for 5%CO2

FLIM:

• Laserkopf für Pikosekunden-Pulse - 557 ± 3 nm, spektrale Breite <1 nm, ca. 3 mW bei 80 MHz - Ausgang Freistrahl
  • Bandpassfilter zur Fluoreszenzdetektion - transmittiert von 576 nm bis 623 nm - blockt von 300 nm bis 569 nm und von 632 nm bis 734 nm - geeignet z.B. für mCherry, Atto565
• LDH-D-C-510 Laserkopf für Pikosekunden Pulse und cw Betrieb - 510 ± 10 nm - inkl. Kollimator und Temperaturstabilisierung - cw nur mit PDL 828 oder PDL 800-D möglich
  • Filtersatz für 510 nm Anregung, bestehend aus: - 1 Laserlinien Filter (25 mm Rundfilter) - 1 Fluoreszenz Bandpass Filter (25 mm Rundfilter)
• LDH-D-C-485 Laserkopf für Pikosekunden Pulse und cw Betrieb - 485 ± 10 nm - inkl. Kollimator und Temperaturstabilisierung - cw nur mit PDL 828 oder PDL 800-D möglich
  • Filtersatz für 485 nm Anregung, bestehend aus: - 1 Laserlinien Filter (25 mm Rundfilter) - 1 Fluoreszenz Bandpass Filter (25 mm Rundfilter)
• LDH-D-C-440 Laserkopf für Pikosekunden Pulse und cw Betrieb - 440 ± 10 nm - inkl. Kollimator und Temperaturstabilisierung - cw nur mit PDL 828 oder PDL 800-D möglich
  • Filtersatz für 440 nm Anregung, bestehend aus: - 1 Laserlinien Filter (25 mm Rundfilter) - 1 Fluoreszenz Bandpass Filter (25 mm Rundfilter) - geeignet für Messungen mit CFP oder Cerulean"

Manufacturer: Zeiss

Zeiss LSM 980 AiryScan with FLIM (PicoQuant)

Das konfokale Mikroskopsystem LSM 980 AiryScan von Zeiss bietet eine hohe Auflösung bei schneller Bildaufnahmerate und kann daher dazu genutzt werden, die Aufnahme von dynamischen Prozessen wie Interaktionen von Partikeln mit lebenden Zellen, Virusinfektionen, Freisetzung von Wirkstoffen und Membranbindungsprozessen darzustellen. Die spektrale Detektion ermöglicht Multiplexing durch Separation der Fluoreszenzspektren der verwendeten Farbstoffe. Das FLIM-Modul von PicoQuant ermöglicht darüber hinaus Fluoreszenzlebenszeitmessung (FLIM) so können z.B. durch die Umgebung verursachte Änderung der Fluoreszenzspektren oder Fluoreszenzlebenszeit detektiert werden.

Geeignet für

• Lebende und fixierte Proben
• Fluoreszenzgefärbte Proben
• Konfoalmikroskopie
• Kachel- oder Mosaik-Scans, z-Stapel, Multicolor-Imaging, Zeitraffer
• FLIM